实验设计在原核表达条件优化中的应用

摘要：

目的 应用实验设计(Design of Experiment,DOE)优化原核表达条件.方法 分别通过单因素变量和DOE方案优化pET32a-Ferritin在E.coil BL21(DE3)中的诱导表达条件(诱导时间、诱导剂浓度和起始菌体密度),并对两种方案得出的诱导条件的表达效率进行比较.结果 单因素变量实验方案的最优条件为:菌体A600为0.6时添加0.5 mmol/L IPTG诱导4 h;DOE方案最优条件为:菌体A600为0.8时添加1.0 mmol/L IPTG诱导10 h.DOE方案更加便捷和准确,且表达效率更高.结论 在处理多因素交互作用问题中,DOE方案能更加便捷地获得准确的外源蛋白表达的最优条件.本研究为原核表达系统的优化提供了新的方案,也为DOE方案在生物工程领域的更多应用提供了参考.

关键词：实验设计、原核表达、优化、响应曲线、Minitab

所属期刊栏目：32

分类号：Q-31;Q786(生物科学的研究方法与技术)

资助基金："十三五"国家科技重大专项:病毒性传染病病原谱和病毒基因变异变迁规律研究2018ZX10713002

在线出版日期：2020-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1322-1328,1342