重组人凝血因子Ⅸ在CHO细胞中的表达和纯化
目的 在CHO细胞中表达并纯化人凝血因子Ⅸ(human coagulation factorⅨ,hFⅨ).方法 将高表达hFⅨ的CHO细胞株在摇瓶中用无血清培养基进行批次培养和补料批次培养,收获补料批次培养上清,通过阴离子交换层析进行纯化,测定纯化产物的蛋白浓度及hFⅨ活性,并进行SDS-PAGE分析.结果 批次和补料批次培养表达的hFⅨ活性分别高达0.62和14.45 IU/mL.纯化后的hFⅨ比活性高达157.19 IU/mg.SDS-PAGE分析表明重组CHO工程细胞株能正确表达hFⅨ.结论 成功在CHO细胞中表达并纯化了高比活性的重组hFⅨ蛋白,为进一步研制重组FⅨ药物奠定了基础.
人凝血因子Ⅸ、中国仓鼠卵巢细胞、阴离子交换层析
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Q786(基因工程(遗传工程))
2019-12-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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