超快速液相色谱法测定大鼠肝细胞中腺苷酸含量
目的 建立大鼠肝细胞中3种腺苷酸[三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)]的超快速液相色谱测定法.方法 制备3种腺苷酸混合标准工作液,同时将BRL大鼠肝细胞样品经超声波破碎仪处理提取目标化合物.液相色谱条件:色谱柱为Poroshell 120 SB-AQ C18(100 mm×3.0 mm,2.7μm),流动相为20 mmol/L磷酸氢二钠+ 20 mmol/L磷酸二氢钠缓冲溶液,流速为0.20 mL/min,柱箱温度为30℃,二极管阵列检测器光谱扫描范围为190~800 nm,定量波长为259 nm,进样量为5μL.同时对方法的线性范围、稳定性、重复性及准确性进行验证.结果 色谱柱对标准品和待检样品的3种腺苷酸组分分离状况良好,样品目标峰位无杂峰干扰,色谱分离在15 min内完成.各目标组分在10~100 μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,检测限在0.652~0.793 μg/mL之间;样品提取液于不同时间点进样所得ATP、ADP和AMP的峰面积RSD分别为2.06%、1.15%和1.26%;6份平行样品在同一检测流程下所得的ATP、ADP和AMP峰面积的RSD分别为2.13%、2.04%和1.89%;样品各组分平均回收率在97.05%~102.58%之间,RSD在2.16%~2.55%之间.结论 建立了大鼠肝细胞中3种腺苷酸含量的超快速液相色谱测定法,且具有良好的线性、稳定性、重复性及准确性.
超快速液相色谱法、腺苷酸、肝细胞、大鼠
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S85261(动物医学(兽医学))
黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划UNPYSCT-2018086;大庆市指导性科技计划zd-2017-34;黑龙江八一农垦大学“校内培育课题资助计划”XZR2015-15
2019-11-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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