人乳头瘤病毒31型L1病毒样颗粒在毕赤酵母中的表达及其免疫原性初步评价
目的 在毕赤酵母中表达人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)31型L1病毒样颗粒(virus-like particles,VLP),并初步评价其免疫原性.方法 构建HPV31 L1四拷贝重组表达质粒,电转化毕赤酵母KM71,甲醇诱导表达蛋白.将重组菌经30 L发酵罐发酵,产物分离纯化,用纯化样品免疫小鼠,采用半数有效剂量(median effectivedose,ED50)初步评价表达产物的免疫原性.结果 经双酶切鉴定,四拷贝重组表达质粒构建正确.表达产物可与小鼠抗HPV L1单抗发生特异性结合.纯化产物在透射电镜下为直径60 nm的VLP结构,相对分子质量约55 000,纯度达95%以上.小鼠体内效价ED50值为0.018μg.结论 成功在毕赤酵母中表达了HPV31型L1 VLP,其在小鼠体内具有良好的免疫原性.
人乳头瘤病毒、病毒样颗粒、毕赤酵母、基因重组、蛋白表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
2019-11-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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