Ⅲ型登革病毒在C6/36及Vero细胞中复制对其毒力的影响
目的 探讨Ⅲ型登革病毒(dengue virus,DENV)在C6/36和Vero细胞中复制对其毒力的影响.方法 将DV3-1及DV3-2两株Ⅲ型DENV在C6/36细胞上接种传代培养,待其毒力稳定再接种至Vero细胞连续传代培养.用Ⅲ型DENV标准质粒检测不同代次病毒拷贝数,PCR扩增获得传代毒种全长基因序列,并与原代病毒基因序列进行比对.结果 DV3-1在C6/36细胞上传代至第17代次(P17-C6/36)时毒力保持稳定,DV3-2在盲传过程中均未见明显的细胞病变;将DV3-1和DV3-2第17代次病毒在Vero细胞上继续传代,DV3-1传至第10代次(P10-Vero)CPE为40％,DV3-2传至第4代次CPE达30％.DV3-1在P17-C6/36时具有较高的病毒拷贝数,在P0(原代病毒)及P10-Vero时病毒拷贝数偏低.与P0比较,P17-C6/36及P10-Vero全长碱基共16处发生突变,导致12个氨基酸的非同义突变,其中P0和P10-Vero在第5 826、6 251、7 907位点碱基相同,P17-C6/36相应的氨基酸位点(第1 942、2 084、2 636位点)均发生非同义突变.结论 传代细胞更换可对Ⅲ型DENV的毒力造成影响,多次传代及更换细胞传代后仍可能发生回复突变.本研究为后续DENV减毒策略的研究提供了实验依据.
Ⅲ型登革病毒、C6/36细胞、Vero细胞、毒力
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R3(基础医学)
国家十二五重大新药创新科技重大专项2012ZX09104302;国家自然科学基金面上项目81171946;云南省科技厅应用基础重点项目2016FA029;云南省科技厅联合支持国家科技计划项目2013GA018;中国医学科学院创新工程项目2016-I2M-1-19;云南自然科学基金项目2012FB188
2019-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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1070-1073,1079
