戊型肝炎病毒ORF2抗原的制备及其免疫原性评价
目的 制备戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2抗原,并对其免疫原性进行分析.方法 通过基因合成获得HEV ORF2目的基因,构建重组杆状病毒,并在sf9昆虫细胞中优化表达;采用超声、硫酸铵沉淀及层析纯化HEV ORF2蛋白,免疫小鼠分析其免疫原性.结果 制备的重组杆状病毒滴度为1×108PFU/mL;重组蛋白表达条件MOI为1,收获时间为5d时,表达量最高为20 mg/L;通过纯化获得HEV ORF2蛋白纯度>95%;其疫苗组血清特异性抗体效价与PBS对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功表达并纯化了HEV ORF2蛋白,该纯化方法可获得纯度较高的目的蛋白,且制备的HEV ORF2蛋白具有很好的免疫原性,可用于制备和开发预防性疫苗.
戊型肝炎病毒、ORF2抗原、sf9昆虫细胞、免疫原性
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R392-33
2019-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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