破伤风抗毒素间接ELISA检测方法的建立及应用

摘要：

目的 建立检测破伤风抗毒素(TAT)效价的间接ELISA法,并进行初步应用.方法 用方阵滴定法确定包被抗原和待检血清的最适工作浓度,并对各种反应条件进行优化,建立间接ELISA法.用建立的间接ELISA法检测3批TAT效价,并与小鼠中和试验法检测结果进行比较.结果 建立的间接ELISA法的最适反应条件:抗原最适包被质量浓度为1.2 μg/mL,血清最佳稀释浓度为400 mIU/mL;抗原与待检血清作用时间为45 min,加入酶标二抗后作用时间为60 min;抗原最适包被缓冲液为0.05 mol/L pH 9.6碳酸盐(CBS)缓冲液,4℃包被12 h;封闭液为30％BSA(5％蔗糖和5％乳糖);酶标二抗最适工作浓度为1:8 000.3批TAT间接ELISA法效价检测结果与小鼠中和试验法效价检测结果相比,差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 建立的间接ELISA法具有较高灵敏度,可用于TAT效价的检测.

关键词：破伤风抗毒素、间接ELISA、效价

所属期刊栏目：32

分类号：R378.8+1;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2019-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：454-457,461