重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺的优化

摘要：

目的 优化重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺.方法 采用试验设计(Design of Experiment,DOE)方法优化重组抗CD52单克隆抗体亲和层析纯化工艺,试验因子为中间清洗液NaCl浓度(130～870 mmol/L)和洗脱液pH(3.50～4.20),试验响应变量为纯化后样品收率、纯度、残余宿主蛋白含量、外源DNA含量及蛋白A含量,通过DOE构建模型,预测中间清洗液NaCI浓度和洗脱液pH范围.同时采用DOE方法验证预测工艺参数的稳定性.结果 确定中间清洗液NaCl浓度为400 ～ 700 mmol/L,洗脱液pH为3.55 ～ 3.75.试验因子在该参数范围内变动时,样品收率均大于80％,纯度均大于97％,外源DNA浓度均低于260 pg/mg,宿主蛋白含量均低于2 300 ng/ mg,蛋白A含量均低于6.5 ng/mg.结论 成功优化了重组抗CD52单克隆抗体的亲和纯化工艺,且具有较好的稳定性.

关键词：重组抗CD52单克隆抗体、亲和层析、试验设计

所属期刊栏目：32

分类号：TQ460.6

资助基金：兰州市科技重大专项2017-02-1

在线出版日期：2019-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：439-444