反向胶束电动毛细管色谱-直接紫外法测定天花粉中的氨基酸

摘要：

目的 建立检测天花粉中氨基酸的高效反向胶束电动毛细管色谱-直接紫外法,并进行验证.方法 样品分离采用未涂层毛细管(75 μm×60 cm,有效长度为49.5 cm),通过运行缓冲液,在一定电压下进样,检测波长为200 nm,样品浓度为50 μg/mL,操作温度为25 ℃.对分离条件中运行缓冲溶液pH(10、11和12)、缓冲体系浓度(40 mmol/LKH2PO4-110 mmol/L NaOH、60 mmol/L KH2PO4-130 mmol/L NaOH、70 mmol/L KH2PO4-140 mmol/L NaOH)、缓冲液阳离子表面活性剂浓度[0.2、0.6、1、1.2 mmol/L十六烷基三甲基氯化铵(cetyltrimethylammonium chloride,CTAC)]、缓冲溶液有机添加剂浓度(5％、10％、15％、20％乙腈)、进样方式(电动进样:-10 kV进样5 s,压力进样:34.5 kPa进样5s)、分离电压(15、20、25 kV)进行优化.同时验证方法的线性、精密性及准确性.采用最适条件检测供试品天花粉中3种氨基酸分离情况.结果 最适检测条件为:运行缓冲液为5％(v/v)乙腈、1 mmol/L CTAC、60 mmol/LKH2PO4-130 mmol/L NaOH (pH 11);压力进样:34.5 kPa×5 s,分离电压:20 kV.瓜氨酸、天冬酰胺和γ-氨基丁酸3种氨基酸的峰面积和浓度均呈良好的线性关系,R2均＞0.99;峰面积RSD分别为4.7％、4.5％和3.8％,迁移时间RSD分别为0.62％、0.93％和1.10％;加标回收率在82.48％～111.16％之间.该方法可有效分离天花粉中的3种氨基酸.结论 本实验建立的方法快速有效,且具有良好的精密性及准确性,可用于天花粉中氨基酸的快速测定.

关键词：反向胶束电动毛细管色谱法、直接紫外法、天花粉、氨基酸

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分类号：O657.8(分析化学)

资助基金：福建省科技厅项目2016Y0054、2017Y0051、2017Y0050;福建省教育厅项目JZ160445;福建中医药大学校管课题重点专项资助X2017012-重点

在线出版日期：2019-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：434-438,444