猪瘟病毒生物反应器低血清培养及其免疫效力检测
目的 利用生物反应器低血清培养基灌流培养猪瘟病毒,制备猪瘟病毒活疫苗,检测其免疫效价.方法 对猪睾丸ST细胞进行低血清培养驯化,待ST细胞适应低血清培养后,接种至生物反应器,当细胞达到接种密度后,感染猪瘟兔化弱毒株(Classical Swine)毒种,培养96 h后,连续收液48 d,收获的病毒液经滤膜过滤后,制备猪瘟病毒活疫苗.将疫苗免疫健康新西兰家兔和28日龄健康仔猪,检测病毒滴度及免疫效价.结果 用2%血清培养ST细胞,细胞接毒密度为5×106个/mL,病毒按3%~5%比例接种.利用上述条件培养的猪瘟病毒连续收获20次,病毒滴度均在7 500 RID/mL以上.免疫仔猪后第14天抗体效价达1∶128,未免疫仔猪抗体效价低于1∶16;攻毒后观察16d,免疫仔猪无任何猪瘟临床表现,保护率100%,而未免疫仔猪在攻毒后第6天开始陆续死亡,死亡率100%.结论 用低血清培养ST细胞制备的猪瘟病毒活疫苗具有较高的免疫效价,为猪瘟病毒疫苗生产工艺的改进奠定了基础.
猪瘟病毒、低血清反应器灌流培养、ST细胞、免疫效价
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Q813.1+1(生物工程学(生物技术))
2019-05-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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