PRRSV2b蛋白互作宿主细胞蛋白的筛选

摘要：

目的 通过酵母双杂交筛选技术从猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)cDNA文库中筛选与猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白互作的宿主细胞蛋白.方法 将PRRSV 2b基因扩增产物克隆至pGBKT7质粒上,构建重组钓饵载体pGBKT7-2b,转化至Y2H Gold酵母感受态中制备钓饵菌株后,进行自激活和毒性检测;将PAM cDNA文库菌株与钓饵菌株进行杂交融合,经DDO/X/A平板筛选后,对筛选的菌株进行PCR鉴定及测序分析.结果 构建的钓饵菌株无毒性和自激活现象;共获得LGALS1、RPL12、LGALS3和RPS20 4种蛋白.结论 成功构建了可用于双杂交筛选的钓饵菌株,筛选出4种与PRRSV 2b蛋白互作的PAM蛋白,其中LGALS1出现概率最高.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、2b蛋白、互作蛋白、猪肺泡巨噬细胞

所属期刊栏目：32

分类号：S852.65+9.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31460662;内蒙古自治区自然科学基金项目2017MS0319

在线出版日期：2019-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：403-407