重组人溶菌酶的分离纯化及鉴定
目的 建立重组人溶菌酶(human lysozyme,hLYZ)的分离纯化方法,并对纯化产物进行鉴定.方法 采用固液分离、膜过滤、疏水层析及离子交换层析对hLYZ进行分离纯化;SDS-PAGE及HPLC法检测hLYZ纯度;按《中国药典》二部(2015版)蛋清溶菌酶效价检查法检测其效价;Western blot法检测其特异性;基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF)测定其相对分子质量.结果 该分离方法 可获得单一组分的重组hLYZ;SDS-PAGE检测纯度达99％,HPLC分析纯度达98.8％;纯化后的hLYZ可与抗人LYZ抗体特异性结合,活性为1.2×105U/mg,相对分子质量为14 697.结论 建立的分离纯化方法 易操作,成本低,得到的hLYZ纯度大于98％,该分离方法 可用于hLYZ的规模化生产.
重组人溶菌酶、疏水层析、离子交换层析、纯化
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Q789(基因工程（遗传工程）)
2019-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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