巢湖蓝藻藻蓝蛋白纯化工艺的优化

摘要：

目的 优化巢湖蓝藻藻蓝蛋白的纯化工艺.方法 将新鲜蓝藻藻泥经冻融破壁处理,获得藻蓝蛋白粗提液.采取两步盐析及Cellfine A-500阴离子交换层析结合法进行纯化,并以纯度和回收率为检测指标,对一步盐析(NH4)2SO4摩尔浓度(0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mol/L)及二步盐析(NH4)25O4摩尔浓度(1.6、1.8、2.0、2.2、2.4 mol/L)、阴离子交换层析缓冲液pH(6.0、6.5、7.0、7.5、8.0)、进样浓度(0.418、0.726、1.044、1.288、2.090 mg/L)、洗脱速度(0.5、1、1.5、2、2.5、3.0cm/min)及洗脱液盐梯度浓度[(0.08、0.10、1.0)、(0.08、0.15、1.0)、(0.08、0.20、1.0)、(0.08、0.25、1.0)、(0.08、0.30、1.0)mol/L]进行优化.同时采用最适条件纯化3批藻蓝蛋白.结果 两步盐析(NH4)2SO4的最适摩尔浓度分别为1.0和1.8 mol/L,阴离子交换层析最适条件为缓冲液pH7.0,进样浓度为1.0～2.0 mol/L,洗脱流速为2 cm/min,洗脱液盐梯度浓度为0.08、0.20、1.0 mol/L.最适条件纯化的3批藻蓝蛋白纯度可达4.0以上,回收率达11％以上.结论 成功优化了巢湖蓝藻藻蓝蛋白的纯化工艺,纯化出了试剂级(纯度4.0以上)的藻蓝蛋白.

关键词：巢湖、蓝藻、藻蓝蛋白、盐析、阴离子交换层析

所属期刊栏目：32

分类号：O657.7+5(分析化学)

资助基金：国家“十二五”科技重大专项资助项目2012ZX07103-004

在线出版日期：2019-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：319-323