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试验设计法优化肺炎支原体培养基

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目的 试验设计(design of experiment,DOE)法优化肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)培养基,以期提高MP产量.方法 以MP(FH株)为试验菌株,PPLO培养基为基础,菌体蛋白含量为响应值,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken试验对脑心浸液、水解乳蛋白、(月示)胨3号、精氨酸、小牛胸腺DNA、葡萄糖和胰蛋白胨7种培养基添加成分进行筛选及优化.以菌体蛋白含量及颜色变化单位(color change unit,CCU)为指标,验证改良培养基培养MP的效果.结果 培养基各添加成分对MP生长影响作用大小依次为葡萄糖、胰蛋白胨、脑心浸液、精氨酸、(月示)胨3号、水解乳蛋白、小牛胸腺DNA,最终筛选出脑心浸液、葡萄糖及胰蛋白胨3种添加物,最适浓度分别为5.68、1.34及2.64g/L.采用改良培养基培养MP 96 h时,菌体蛋白含量及CCU达最大,分别为851.29 μg/mL及109 ccu/mL.结论 DOE法实现了对MP培养基的优化,获得了影响MP生长的主要参数,提高了MP菌体产量.

肺炎支原体、PPLO培养基、试验设计、优化

32

R375+.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

国家自然科学基金“青年科学基金”项目31500011;中国医学科学院医学与健康科技创新工程经费资助项目2016-I2M-3-026;云南省创新团队项目2015HC027

2019-03-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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中国生物制品学杂志

1004-5503

22-1197/Q

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2019,32(1)

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