大肠埃希菌外膜囊泡作为新型外源质粒递送载体的研究

摘要：

目的 探讨大肠埃希菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)作为新型DNA疫苗递送载体的潜力及价值.方法 从大肠埃希菌DH5α的培养上清中经过滤、超滤、超速离心等步骤收集天然分泌的OMVs,采用密度梯度离心法纯化OMVs.将纯化后的OMVs与哺乳动物吞噬细胞及非吞噬细胞进行体外孵育,观察不同细胞对OMVs的摄取效率.通过电击转化方式将带绿色荧光蛋白的真核表达质粒pIRES2-EGFP转入OMVs中,并与RAW264.7细胞共孵育,观察OMVs携带真核表达质粒进入细胞并表达绿色荧光蛋白的情况.结果 密度梯度离心法可有效纯化OMVs,纯化后的OMVs进入不同哺乳动物细胞的效率不同,进入吞噬细胞的效率高于非吞噬细胞,经电击转化后,质粒DNA可被导入OMVs中,并随吞噬细胞摄取及表达.结论 约5 300 bp的真核表达质粒可用电击方式导入OMVs中,并通过OMVs介导该质粒在吞噬细胞中表达,提示OMVs具有作为新型质粒DNA递送载体的潜力.

关键词：细菌外膜囊泡、质粒、递送系统、DNA疫苗

所属期刊栏目：32

分类号：R373.2+3;Q75(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：中国医学科学院医学与健康科技创新工程2016-I2M-1-019;云南省科技计划项目2016FA049;北京协和医学院病原生物研究所基本科研业务专项费项目2014IPB107

在线出版日期：2019-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：10-14,19