表面等离子共振技术分析抗A型肉毒毒素及抗破伤风毒素的单克隆抗体表位

摘要：

目的 通过表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术对抗A型肉毒毒素(botulinum toxin A,BONT/A)及抗破伤风毒素(tetanus toxin,TT)的单克隆抗体进行抗原表位分析.方法 采用CM5芯片,通过氨基偶联抗BONT/A诊断血清,经Biacore T200捕获BONT/A,再进样抗BONT/A单克隆抗体A-13、A-14、C-5,通过响应值(response unit,RU)的变化来判断是否针对同一表位,并通过动物实验对抗BONT/A单克隆抗体进行生物学活性验证;采用CM5芯片,氨基偶联TT,经Biacore T200分别进样人源化抗TT单克隆抗体G2及G6,通过RU的变化来判断是否针对同一表位.结果 抗BONT/A的3株单克隆抗体中,单克隆抗体A-13连续3次进样后,A-14继续进样的RU略降低,C-5进样的RU明显升高,A-13+A-14、A-13+C-5、A-14+C-5组合进样的相加指数(AI)分别为35.8％、98.2％、96.0％.BONT/A剂量为2 000 LD50时,A13+ C5及A14+ C5组小鼠在96 h内均死亡1只,A13+A14组小鼠24 h内全部死亡.G2连续3针进样后,G6进样的RU升高至825.6;G6连续3针进样后,G2进样的RU升高至3 689.2.结论 A-13及A-14针对同一抗原表位,与不同表位C-5之间抗体存在协同效应;抗TT的2株单克隆抗体针对不同抗原表位.

关键词：表面等离子共振、A型肉毒毒素、破伤风毒素、单克隆抗体、表位分析

所属期刊栏目：31

分类号：Q657.99;R392-33(生物热学)

在线出版日期：2019-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1386-1392