鸡干扰素γ的原核表达及其抗传染性法氏囊病毒的活性分析

摘要：

目的 原核表达鸡干扰素γ(chicken interferon γ,ChIFNγ),并对其抗传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)活性进行检测.方法 PCR法扩增ChIFNγ基因,克隆至载体pET-28a中,转化感受态E.coliBL21,经IPTG诱导表达,His-binding-resin柱进行纯化.取200 ng纯化蛋白,加至鸡胚成纤维细胞,37℃孵育24 h,接种IBDV,攻毒48 h观察细胞病变情况.将纯化蛋白经腹腔注射14日龄雏鸡,200 μg/只,24 h后再注射1次,48 h后用IBDV进行感染,103 TCID5o/只,感染48 h后无菌取鸡法氏囊组织,进行病理学及qRT-PCR检测.结果 纯化蛋白相对分子质量约18 000,可与抗His标签单克隆抗体发生特异性结合,浓度约0.8 mg/mL.加入纯化蛋白的鸡成纤维细胞病变明显减轻;注射纯化蛋白雏鸡的法氏囊组织病变减轻,病毒载量明显降低(P＜0.001).结论 本实验成功表达了ChIFNγ重组蛋白,且于体内、外均有抑制IBDV的作用,为该蛋白的应用提供了实验依据.

关键词：鸡、干扰素γ、基因重组、蛋白表达、传染性法氏囊病毒

所属期刊栏目：31

分类号：Q511;Q789(蛋白质)

资助基金：黑龙江省大学生创新创业项目201710223046

在线出版日期：2019-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1340-1343,1351