牛传染性鼻气管炎病毒gC结构蛋白的真核表达及其反应原性分析

摘要：

目的 真核表达牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gC结构蛋白,并对其反应原性进行鉴定.方法 以GenBank中登录的IBRV基因序列合成gC基因全长,构建重组真核表达质粒pCDNA4-gC-His,并进行双酶切鉴定.将鉴定正确的质粒转染MDBK细胞,收集上清,镍柱纯化带有His标签的重组gC蛋白,经Dot blot和间接免疫荧光法鉴定其反应原性.结果 质粒pCDNA4-gC-His经双酶切鉴定证明构建正确,表达的重组gC蛋白相对分子质量约54 000,纯化后的浓度为0.03 mg/mL,可与IBRV免疫的兔多抗发生反应.结论 成功构建了真核表达质粒pCDNA4-gC-His,并能在MDBK细胞系中正确表达,表达的蛋白与天然IBRV gC蛋白具有相同的反应原性,为后续免疫学诊断方法的建立奠定了基础.

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒、gC蛋白、真核表达、反应原性

所属期刊栏目：31

分类号：R852.65+3(航空航天医学)

资助基金：黑龙江省农垦总局攻关课题HNK125B-11-10A,HNK125B-11-08A

在线出版日期：2019-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1333-1335,1339