人热休克蛋白10在毕赤酵母中的表达及纯化

摘要：

目的 在毕赤酵母中表达及纯化人热休克蛋白10(heat shock protein 10,Hsp10).方法 取新鲜人胎盘组织提取总RNA,反转录合成cDNA.以其为模版PCR扩增Hsp10基因片段,构建外分泌重组表达载体pPIC9K-Hsp10,电击转化毕赤酵母GS115菌株,经组氨酸缺陷筛选,获得阳性菌株pPIC9K-Hsp 10/GS115.重组菌经甲醇诱导,SDS-PAGE检测蛋白含量,Western blot分析Hsp10特异性.结果 获取了序列正确的Hsp10基因及高表达菌株.表达产物在相对分子质量11000处可见特异表达条带,Hsp10蛋白表达量为400 mg/L,纯度大于90％;Western blot分析表明,Hsp10具有良好的反应原性和特异性.结论 Hsp10在毕赤酵母GS115中成功表达,为该蛋白的放大生产及应用奠定了基础.

关键词：人热休克蛋白10、毕赤酵母、真核表达、纯化

所属期刊栏目：31

分类号：R373.2+3;Q75(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1066-1070