壳聚糖介导甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC DNA疫苗的构建及其免疫效果

摘要：

目的 构建壳聚糖(chitosan,CS)介导的甲型副伤寒沙门菌nmpC和pagC的DNA疫苗,并探讨该疫苗的免疫效果.方法 按哺乳动物的密码子偏好性对nmpC和pagC的基因序列进行优化,并将优化后的序列克隆至真核表达载体provax中,构建provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗.采用复凝聚法制备载DNA疫苗的CS纳米粒,并对CS/DNA纳米粒的特性进行检测.将provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗及其相应的CS纳米粒体外转染BHK细胞,采用Western blot检测目的蛋白的表达.采用活体电击法分别用不同组分的蛋白免疫小鼠,ELISA法检测血清抗体水平及抗体类型.结果 provax-nmpC和provax-pagC DNA疫苗经双酶切鉴定,构建正确.疫苗可与CS发生有效结合,纳米粒形似球形,粒径均一,包封率均达90％以上,且CS可防止DNA被DNase Ⅰ酶降解.provax-nmpC及CS/provax-nmpC均能诱导小鼠产生有效的免疫反应,两组间差异无统计学意义(P＞0.05);provax-pagC与CS/provaxpagC均能诱导小鼠产生有效的免疫反应,且provax-pagC组的抗体水平明显高于CS/provax-pagC(P＜0.05).provax-nmpC和provax-pagC组的IgG1及IgG2a抗体水平均高于相应的CS组(P＜0.05),且IgG1和IgG2a间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DNA疫苗provax-nmpC和provax-pagC均可诱导有效的免疫反应;载基因CS纳米粒并未增强DNA疫苗的免疫效果;CS未改变DNA疫苗的免疫应答类型,但具有调节Th1和Th2平衡的作用.

关键词：壳聚糖、甲型副伤寒沙门菌、nmpC、pagC、DNA疫苗

所属期刊栏目：31

分类号：R378.2+4;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2018-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1055-1060