人乳头瘤病毒16型嵌合病毒样颗粒体外形成实验方法的建立

摘要：

目的 建立人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型嵌合病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)体外形成实验的方法.方法 以HPV16型L1为模板,将两个L2保守序列(aa56 ～ 75,aal08 ～ 120)分别插入L1两个可插入位点(DE袢状区,h4状区),构建出4种嵌合蛋白基因,利用Bae-to-Bae杆状病毒-昆虫表达系统表达嵌合的4种VLP蛋白,经蔗糖密度梯度离心纯化,纯化的目的蛋白进行VLP体外解聚重聚实验,Western blot分析体外解聚重聚前后的蛋白.结果 表达及纯化的4种HPV16 L1-L2嵌合蛋白相对分子质量均约60 000,大小与预期相符;经VLP体外解聚重聚实验,使不能很好自组装的4种HPV16 L1-L2嵌合蛋白组装形成VLP,并具有免疫原性.结论 建立的方法有助于HPV嵌合VLP的形成,能够明显提高其组装效率,为以L2蛋白为目标的第二代HPV疫苗的嵌合VLP体外组装提供了可行的实验方法.

关键词：人乳头瘤病毒16型、基因重组、嵌合病毒样颗粒、体外重组实验

所属期刊栏目：31

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2018-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：999-1003,1010