基孔肯雅病毒E2蛋白的原核表达及纯化

摘要：

目的 原核表达并纯化基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)E2主要结构蛋白,为预防CHIKV感染及亚单位疫苗的研究奠定基础.方法 根据GenBank上公布的CHIKV基因序列合成E2基因,并进行密码子优化,以提高原核表达效率.设计引物并以合成的E2基因为模板,PCR扩增CHIKV E2,连接到原核表达载体pET-28a上,构建重组原核表达质粒pET-28a-CHIKV E2,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定后进行纯化.结果 重组原核表达质粒pET-28a-CHIKV E2经双酶切鉴定构建正确,测序结果与原序列一致.表达的CHIKV E2融合蛋白相对分子质量约为47 000,可与His标签抗体特异性结合,纯化后纯度达95％以上.结论 成功在大肠埃希菌中表达了CHIKV E2蛋白,纯化后蛋白纯度较高,为CHIKV亚单位疫苗的免疫试验奠定了基础.

关键词：基孔肯雅病毒、原核表达、纯化

所属期刊栏目：31

分类号：R373.9;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家重点研发计划项目重要新发突发病原体防治、处置技术与产品研究,2016YFC1200900

在线出版日期：2018-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：936-940