肺炎链球菌表面抗原PsaA-PspA融合蛋白双抗夹心ELISA定量检测方法的建立及验证

摘要：

目的 建立快速测定肺炎链球菌表面抗原PsaA-PspA融合蛋白含量的双抗夹心ELISA方法,并进行验证.方法 制备PsaA-PspA抗原,确定PsaA单抗和PsaA-PspA兔多抗的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA方法.对方法的抗原特异性、精密性和准确性进行验证,并分析变性抗原对测定的影响.结果 单抗和兔多抗最佳稀释倍数为1∶500和1∶10 000.建立的双抗夹心ELISA法检测PsaA-PspA抗原的浓度范围为70 ～ 560 ng/ mL,R2为0.993 8;该方法不适用于其他抗原的测定,但可用于鉴定抗原是否变性;该方法检测不同批次PsaA-PspA抗原的批内平均变异系数(CV)为4.9％,批间平均CV为19％,平均回收率为88.98％.结论 建立的双抗夹心ELISA方法特异性、精密性和准确性良好,可用于PsaA-PspA融合蛋白浓度的检测,且可检测抗原是否变性.

关键词：肺炎链球菌、表面抗原、PsaA-PspA融合蛋白、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：31

分类号：R378.1+4;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2018-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：892-895,901