柱前衍生化液相色谱法测定牛血清中游离氨基酸含量

摘要：

目的 建立牛血清中18种游离氨基酸含量的柱前衍生化液相色谱测定方法,并进行验证.方法 采用乙腈沉淀方法去除血清样品中的蛋白,以异硫氰酸苯酯(phenylisothiocyanate,PITC)在三乙胺碱性条件下衍生游离氨基酸,采用氨基酸分析柱(Sepax AAA,250 mm×4.6 mm ID)及乙腈-醋酸钠缓冲体系梯度洗脱分离18种目标组分,紫外检测器波长为254 nm.对建立的方法进行重现性、准确性和精密性验证,并确定方法的线性范围及检测限.结果 18种游离氨基酸在60 min内完成分离,各目标组分在0.5～2.5μmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,方法检测限在0.019～0.163 μmol/L之间,相对标准偏差(RSD)在0.42％ ～2.28％之间.准确性和精密性试验中检测各组分的平均回收率在93.10％～101.61％之间,RSD在0.19％～3.82％之间.结论 采用PITC柱前衍生化液相色谱法可实现牛血清中18种游离氨基酸的含量测定,该方法简便易行,重现性、准确性及精密性良好,可为动物营养及生理研究提供检测手段.

关键词：柱前衍生化、液相色谱法、牛血清、游离氨基酸

所属期刊栏目：31

分类号：O657.7+2(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金项目31472249;大庆市指导性科技计划项目zd-2017-34;黑龙江八一农垦大学“校内培育课题资助计划”项目XZR2015-15

在线出版日期：2018-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：869-873