基于免疫磁珠快速富集分离土壤中炭疽芽孢方法的建立

摘要：

目的 建立基于免疫磁珠快速富集分离土壤中炭疽芽孢的方法.方法 将炭疽芽孢杆菌疫苗株培养形成芽孢,灭活后免疫家兔,获得多克隆抗体,与磁珠偶联制备免疫磁珠,并检测其在纯炭疽芽孢稀释液中对炭疽芽孢富集分离的敏感性.通过对模拟土壤样品中炭疽芽孢抽提效果的比较,选择最优的芽孢抽提液及抽提条件.采用多重PCR法评价免疫磁珠对土壤中的炭疽芽孢在PLET平板培养基上富集分离的效果.结果 10 mg磁珠经活化后与500 μL抗体偶联效果最佳,制备的免疫磁珠在纯炭疽芽孢稀释液中,富集分离的敏感性可达19 cfu/mL.以0.5％Triton X-100蔗糖PBS溶液作为芽孢抽提液,经1 000×g离心5 min后芽孢提取率最高.在模拟土壤样品中,检测敏感性可达100 cfu/g土壤,PLET平板培养基检测的阳性率达30％.结论 本研究建立的免疫磁珠法简单实用,适用于土壤等各种类型环境样品中炭疽芽孢的检测.

关键词：免疫磁珠、炭疽芽孢、多克隆抗体、土壤

所属期刊栏目：31

分类号：R378.8+2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：吉林省青年科研基金20150520130JH;武汉市科技计划项目2014060101010051

在线出版日期：2018-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：763-766,770