汉坦病毒76-118株假病毒的构建及其在中和试验中的应用

摘要：

目的 构建含有汉坦病毒76-118株包膜蛋白的假病毒,并初步探讨双价肾综合征出血热(hemorrhagic fever wiht renal syndrome,HFRS)灭活疫苗效价检测的新方法.方法 提取汉坦病毒76-118株病毒RNA,PCR扩增获得M基因,将其插入真核表达质粒,获得重组表达质粒PcDNA3.1-M.将质粒PcDNA3.1-M与HIV假病毒构建体系DMEM 1、Lenti-HG和HGtransgene reagent瞬时共转染Vero-E6细胞,48 h后,收集假病毒上清,对其滴度、单轮感染性、蛋白量及中和活性进行检测,并应用于双价HFRS灭活疫苗抗血清的检测.结果 质粒PcDNA3.1-M经酶切及测序鉴定证明构建正确.假病毒对Vero-E6细胞的感染性滴度为8×107 TU/mL,能被76-118株抗血清中和,从而失去感染性,其中和活性与野生型病毒一致.基于假病毒的效价检测方法对效价合格血清进行再检测时结果均达到了预期要求.结论 构建了含有汉坦病毒76-118株包膜蛋白的假病毒,构建的假病毒可以应用于中和试验,并与野生病毒的检测结果具有高度相关性,为下一步检测双价HFRS灭活疫苗的效价提供了可能.

关键词：汉坦病毒、假病毒、质粒、效价、中和试验

所属期刊栏目：31

分类号：R373.3+2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2018-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：701-707