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应用复合纯化介质Capto Core700纯化狂犬病疫苗

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目的 应用复合凝胶Capto Core700作为纯化介质去除狂犬病疫苗中的Veto细胞宿主蛋白和宿主细胞DNA等杂质.方法 将Vero细胞接种至微载体,在celligen plus生物反应器中培养,按MOI=0.002接种狂犬病病毒,连续制备10批狂犬病疫苗原液.经过滤及浓缩后加入β-丙内酯,于2~8℃灭活24 h,获得病毒灭活液.上样至装载复合凝胶Capto Core700的纯化柱进行层析纯化,并按《中国药典》三部(2015版)的方法检测宿主细胞蛋白去除率、宿主细胞DNA去除率、狂犬病病毒糖蛋白回收率及总蛋白去除率.同时与传统Sepharose系列凝胶纯化方法进行比较.结果 10批疫苗纯化液的宿主细胞蛋白去除率为58.3%~63.2%,宿主细胞DNA去除率均>90%,糖蛋白回收率范围为52.3% ~ 74.5%,蛋白去除率范围为7.22% ~ 11.76%.与传统Sepharose系列凝胶纯化方法比较,差异较小,且Capto Core700的上样量为3倍柱体积,高于Sepharose凝胶(15%).结论 Capto Core700凝胶可有效去除狂犬病疫苗中的杂质,缩短了纯化工艺时间.

狂犬病疫苗、Vero细胞宿主蛋白、Vero细胞宿主DNA、Capto Core700

31

R373.9;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))

2018-08-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

538-542

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1004-5503

22-1197/Q

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