前蛋白转化酶枯草溶菌素9单克隆抗体抗原结合活性间接ELISA测定方法的建立
目的 建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)单克隆抗体抗原结合活性的间接ELISA测定方法.方法 利用链酶亲和素-生物素系统捕获包被PCSK9蛋白,采用间接ELISA法检测PCSK9单抗参比品和供试品,通过拟合四参数方程Y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D,得出两者的半数有效浓度(concentration for 50％ of maximal effect,EC50),计算供试品的抗原结合活性.同时验证该方法的专属性和精密性.结果 PCSK9单抗参比品、供试品及Evolocumab(Amgen)的曲线均呈显著的剂量依赖关系,符合四参数方程,且R2＞0.99;抗CD115抗体及空白稀释液不存在类似的剂量效应曲线;重复性、人员及日间精密性的相对标准偏差(relativestandard deviatin,RSD)分别为7.5％、11.3％和10.4％,均＜15％.结论 成功建立了抗PCSK9单抗抗原结合活性的间接ELISA检测方法,该方法专属性和精密度良好,可用于PCSK9单抗抗原结合活性的常规测定.
前蛋白转化酶枯草溶菌素9、单克隆抗体、抗原结合活性、酶联免疫吸附试验
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R392-33
2018-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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