氯仿抽提纯化CA16病毒最优条件的筛选
目的 筛选氯仿抽提纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的最优条件.方法 根据《中国药典》三部(2015版)的相关要求,选择病毒感染性滴度、残余蛋白、残余牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、残余卡那霉素及残余氯仿含量等指标,分析氯仿抽提的不同条件及超滤浓缩对纯化产物质量指标的影响.将CA16浓缩病毒液与氯仿按不同体积比进行一抽多洗纯化,分析不同比例氯仿对纯化效果的影响;将CA16超滤浓缩病毒液分别用不同浓度的PBS洗涤,以评价不同离子浓度的PBS洗涤对纯化病毒纯化液质量指标的影响.结果 不同浓度的PBS洗涤液、病毒液与氯仿体积比对纯化液病毒感染性滴度均无明显影响,病毒回收率平均为81.7％;随着PBS洗涤次数的增多,洗液中的杂蛋白逐渐减少,氯仿比例及PBS离子浓度对蛋白去除率影响不明显,蛋白去除率均大于82％(82.69％ ～ 93.6％),平均去除率88.37％;不同氯仿比例、不同PBS浓度及不同洗涤次数对残余卡那霉素含量无明显影响,结果均低于30 ng/ mL,经超滤浓缩后,其含量低于3.0 ng/mL;氯仿抽提纯化残余BSA的去除率可达68.87％,若结合超滤浓缩工艺,残余BSA的去除率可达94.74％;超滤浓缩后纯化病毒液残余氯仿去除率可达98％以上,最终纯化液残余氯仿含量小于6μg/mL.结论 氯仿抽提方法结合超滤浓缩可得到符合要求的CA16病毒实验性疫苗.
柯萨奇病毒A组16型、氯仿抽提、疫苗、质量控制
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R373.2+3;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
云南省重点新产品开发计划2015BC008
2018-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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