丙型肝炎病毒人源单克隆抗体的初步筛选

摘要：

目的 构建天然人源噬菌体抗体库,初步筛选人源抗丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)多肽抗原的单克隆重组噬菌体抗体.方法 以健康成人外周血淋巴细胞cDNA为模板,采用PCR技术扩增轻(VL)、重链(VH)可变区基因;重叠PCR法拼接生成单链抗体可变区基因片段(single chain fragment variable,scFv),并克隆至噬菌体载体pCANTAB5e,得到初级抗体库;使用HCV多肽混合抗原,经3轮淘筛富集噬菌体抗体;Phage ELISA法初步筛选HCV重组噬菌体抗体.结果 成功构建了天然人源噬菌体抗体库.scFv(VH-κ)库的库容为6.0×107 PFU/mL,scFv(VH-λ)库的库容为4.28×109 PFU/mL;经初步淘筛,成功获得HCV三级抗体库;Phage ELISA得到了3株候选重组噬菌体抗体.结论 初步得到HCV多肽抗原重组噬菌体抗体,为今后进一步筛选高亲和力噬菌体抗体和可溶抗体奠定了基础.

关键词：丙型肝炎病毒、人源单克隆抗体、噬菌体抗体库

所属期刊栏目：31

分类号：R373.2+1;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：云南省应用基础研究计划项目2016FB037,2013FZ135;协和青年基金3332016114;中央高校基本科研业务费专项资金2016ZX350070;中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目2017-12M-2-006

在线出版日期：2018-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：251-256