发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒抗原超速离心纯化方法的建立
目的 建立发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)抗原的超速离心纯化方法.方法 将SFTSV工作种子库毒种接种至Vero细胞,病毒培养物经灭活及浓缩后制备病毒浓缩液.病毒浓缩液通过20%蔗糖超速离心富集分离,再经60%、50%、40%、30%、20%、10%蔗糖密度梯度超速离心进一步纯化,将病毒抗原富集的组分进行合并,经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 病毒抗原富集于组分22 ~ 26中,合并后经SDS-PAGE分析可见相对分子质量约60 000及28 000的糖蛋白(GP)及核蛋白(NP)条带,纯度约90%,浓度为2.58 mg/ml,且可与兔抗SFTSV全病毒多克隆抗体发生特异性结合.结论 成功建立了SFTSV的超速离心纯化方法,纯化制备出了高纯度的病毒抗原,为SFTSV灭活疫苗的研制奠定了基础.
发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒、病毒纯化、蔗糖密度梯度超速离心
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R373.9;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
十二五重大新药创制项目2013ZX09102029
2017-12-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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