GⅡ.17型诺如病毒单克隆抗体的制备及鉴定
目的 制备抗GⅡ.17型诺如病毒(noroviruses,NoV)单克隆抗体,并鉴定其生物学特性.方法 将小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0与经GⅡ.17 NoV VLPs抗原免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,通过替代性的中和试验筛选出阳性杂交瘤细胞,制备单克隆抗体并进行纯化,ELISA法检测单克隆抗体效价,SDS-PAGE法检测单克隆抗体纯度,BCA法检测单克隆抗体浓度,Biacore法检测单克隆抗体亲和力,亚型试剂鉴定单克隆抗体亚型,并进行各单克隆抗体与不同型NOV VLPs-唾液人类组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)的交叉中和试验,单抗与不同型NOV VLPs结合能力的Western blot鉴定.结果 筛选出3株具有中和活性的细胞株,分别命名为E12、B7、H7,纯化后的3株单克隆抗体效价均在106以上,浓度分别为6.932、2.662和2.371 mg/ml,亲和力常数KD均为10-9 mol/L,单克隆抗体E12的纯度在93％以上,属于IgG2a亚型,单克隆抗体B7和H7的纯度分别在98％以上,属于IgG1亚型.3株单克隆抗体仅对GⅡ.17型NoV具有中和活性,对其他型的NoV无中和活性,且与8种抗原均发生结合反应,但E12对8种抗原的结合能力较B7、H7差.结论 已成功制备出抗GⅡ.17 NoV的单克隆抗体,为进一步研究该病毒的生物学特性及疫苗的开发奠定了基础.
GⅡ.17型诺如病毒、单克隆抗体
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R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2017-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1168-1172,1176
