牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的可溶性表达

摘要：

目的 可溶性表达牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2蛋白.方法 参考BVDV NADL株序列设计1对特异性引物,PCR扩增BVDV NADL株E2全长编码区片段,目的片段经限制性内切酶克隆入质粒pET28a,经双酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒转化E.coli Rosetta (DE3)宿主菌,37℃IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析;表达的重组蛋白经Ni-NTA Purification System纯化后进行SDS-PAGE鉴定.结果 表达的重组E2蛋白相对分子质量约45 000,主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋白的38.9％,可与BVDV阳性血清发生特异性反应,纯度达95％以上,浓度约3.8 mg/ml,产量可达4.96 mg/L细菌培养物.结论 实现了可溶性重组BVDV E2蛋白在原核表达系统中的表达,并具有较好的生物学活性.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、E2蛋白、可溶性表达

所属期刊栏目：30

分类号：S852.65+3;Q789(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省大学生创新创业训练计划项目201610223-021;黑龙江省农垦总局攻关课题HNK125B-11-08A,HNK125B-11-02;“十二五”农村领域国家科技计划课题2012BAD12B03-3

在线出版日期：2017-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1135-1139