两种凝胶过滤介质纯化Sabin株脊髓灰质炎病毒效果的比较
目的 比较两种不同的凝胶过滤介质对Sabin株脊髓灰质炎病毒的分离纯化效果.方法 将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒收获液各3批经超滤浓缩后,分别采用Sepharose CL-6B和Sepharose 6FF填料进行凝胶过滤纯化,分段收集各纯化峰,检测D抗原及蛋白含量,计算比活性、蛋白去除率及抗原回收率,确定病毒峰收集范围.取抗原含量最高的病毒收获液,利用DEAE Sepharose FF离子交换填料进行纯化后,检测Vero细胞DNA残留量、Vero细胞蛋白残留量、牛血清白蛋白残留量、抗生素残留量.结果 Sepharose 6FF填料按6％柱体积上样进行凝胶纯化,纯化的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒收获液抗原回收率均值分别为78.69％、78.03％和78.37％,与Sepharose CL-6B填料按3％柱体积上样(77.29％、78.60％和77.36％)相比,差异无统计学意义(P＞0.05).两种填料纯化的各型收获液再经离子交换纯化后,蛋白去除率、比活性、Vero细胞DNA残留量、Vero细胞蛋白残留量、牛血清白蛋白残留量、抗生素残留量检测结果均符合《中国药典》三部(2015版)相关要求,两种填料纯化的各型收获液比活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 使用Sepharose 6FF纯化的各型病毒纯化液抗原回收率和比活性与Sepharose CL-6B无明显差异,但可以减少纯化的上样次数,大幅提高纯化效率,可用Sepharose 6FF替换Sepharose CL-6B.
脊髓灰质炎病毒、层析纯化、凝胶过滤、离子交换
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R373.2+2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
中国医学科学院重大协同创新项目2016-12M-1-019;云南省重大科技专项2016ZF003
2017-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1086-1091,1095
