Photobacterium sp.QH氨肽酶的基因克隆及其序列、酶学性质分析

摘要：

目的 克隆盐湖菌株Photobacterium sp.QH(Ps sp.QH)氨肽酶的基因,并对其进行序列及酶学性质分析.方法 从青海盐湖采集水样,筛选Ps sp.QH菌株,进行16S rRNA分子生物学测定.通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析法从筛选菌株的发酵液中纯化氨肽酶,同时对其进行质谱分析,基因克隆及酶学性质分析.结果 获得的菌株Ps sp.QH与Photobacterium halotolerans为同一属.该菌株分泌的氨肽酶属于金属螯合氨肽酶M28家族,全基因序列长1 527 bp,共编码508个氨基酸,预测其全酶分子相对分子质量为55 900,氨基酸序列与Photobacterium halotolerans氨肽酶(KKC99795.1)同源性达98％.该氨肽酶在50℃时酶活最高,40～50℃及pH 8.5时稳定性较好;Co2+对其有激活作用,Mg2+、Mn2+、Zn2+、Ca2+、Fe2+及Cu2+对其有不同程度的抑制作用;该酶在1～3 mol/L的NaCl溶液中仍保持较高活性.结论 Ps sp.QH分泌的氨肽酶对高盐有一定的耐受性,具有潜在的工业应用价值.

关键词：Photobacterium sp.QH、氨肽酶、基因克隆、酶学性质、质谱分析

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分类号：Q566+.3(维生素)

资助基金：长治医学院科研启动基金QDZ201504,QDZ201517;2015年山西省高等学校大学生创新创业训练项目2015299

在线出版日期：2017-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1017-1021,1027