一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗纯化方法的建立

摘要：

目的 建立一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗CPS9V-CRM197的纯化方法.方法 将9V型肺炎球菌多糖(CPS9V)与载体蛋白(CRM197)通过胺还原法进行偶连结合,制备成多糖蛋白结合物CPS9V-CRM197.通过超滤及阴离子层析两步法纯化后,经皮下免疫BALB/c小鼠,5μg/只,首次免疫后14 d进行第2次免疫.于末次免疫后0、7、14、21 d经颈动脉采血,分离血清,ELISA法检测血清中的IgG及IgM抗体滴度.结果 纯化的CPS9V-CRM197结合物纯度达100％,多糖的总回收率为95％,分子半径为8.4nm,CL-4B色谱洗脱体积为50.32 ml,酶解敏感性高于载体蛋白CRM197.末次免疫后7、14、21 d时,CPS9V-CRM197免疫小鼠血清中IgG及IgM的滴度均明显高于CPS9V组(P＜0.05).结论 本实验建立的肺炎多糖结合物两步纯化法具有高效、快速等优点,可用于进一步提高实际工业化生产中的生产效率.

关键词：肺炎球菌多糖、载体蛋白、结合疫苗、纯化、免疫原性

所属期刊栏目：30

分类号：R378.1+4;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2017-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：764-768