生物反应器培养Vero细胞制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗
目的 在生物反应器中用微载体连续灌流培养Vero细胞,制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗.方法 在50 L体积的生物反应器中,加入含10 g/L微载体的DMEM培养基,接种Vero细胞,当细胞密度约达5× 106个/ml时,感染肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)毒种,接毒后72 h开始收获,连续收获17 d,收获的病毒原液经浓缩、灭活、Sepharose 4FF凝胶层析纯化后制备疫苗,检测病毒滴度、抗原含量及残余牛血清白蛋白、DNA、宿主蛋白含量,并接种新西兰家兔,检测疫苗效力.结果 确定最佳Vero细胞接种浓度为1×105个/ml,病毒最佳MOI为0.015.利用优化后的培养条件收获的病毒滴度在6.5~8.0 logCCID50/ml,且各项检测指标均符合《中国药典》三部(2010版)相关规定.结论 用生物反应器微载体灌流培养制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗的小试工艺可行.
生物反应器、灌流培养、Vero细胞、Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗
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R373.3+2;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2017-07-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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