毕赤酵母表达人胰岛素前体的不均一性分析

摘要：

目的 对毕赤酵母表达人胰岛素前体的不均一性进行分析.方法 应用疏水层析和C18反相制备,对毕赤酵母分泌表达的胰岛素前体蛋白进行分离纯化,纯化产物经SDS-PAGE、分子排阻高效液相色谱(SEC-HPLC)、反相高效液相色谱(RP-HPLC)、质谱相对分子质量分析,并进行C-末端和N-末端测序.结果 SDS-PAGE测定为单一条带,SEC-HPLC测定为单一峰,但RP-HPLC检测结果出现2个峰;峰2相对分子质量为5 959,是正常的胰岛素前体,峰1为两种混合物,相对分子质量分别为5 716和5 816,可能是缺少了1～2个氨基酸产物;N-末端分别缺少了1个氨基酸(Phe)和2个氨基酸(Phe-Val),C-末端未发生降解.结论 利用毕赤酵母得到的人胰岛素前体存在不均一现象,为胰岛素制备提供了新思路.

关键词：毕赤酵母、胰岛素前体、不均一性

所属期刊栏目：30

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：山东省科技重大专项2015ZDJQ05001

在线出版日期：2017-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：577-581