恶性疟原虫PfEMP1蛋白N-末端片段与铜绿假单胞菌去毒外毒素的偶联构建

摘要：

目的 将恶性疟原虫红细胞膜表面蛋白1(Plasmodiumfalciparum erythrocyte membrane protein 1,PfEMP1)N-末端区段(N-terminal segment,NTS)共价偶联到重组铜绿假单胞菌去毒外毒素(recombinant exoprotein A,rEPA)上,构建NTS-rEPA偶联蛋白,以提升NTS的免疫原性.方法 用偶联试剂Sulfo-EMCS将马来酰亚胺基团加到rEPA上,利用NTS所携带的1个自由巯基将NTS共价连接到马来酰亚胺化的rEPA上,形成NTS-rEPA偶联蛋白,通过分子排阻层析从偶联反应产物中去除未偶联的蛋白.采用Ellman反应测定rEPA上所携带的马来酰亚胺基团数量以及NTS-rEPA偶联蛋白的偶联比,SDS-PAGE鉴定纯化的偶联蛋白.结果 通过偶联试剂Sulfo-EMCS在每摩尔rEPA上加上了4.3摩尔的马来酰亚胺基团;NTS与马来酰亚胺化的rEPA反应生成了NTS-rEPA偶联蛋白,偶联比为4.1;通过分子排阻层析去除了未偶联的蛋白,得到了纯化的偶联蛋白.结论 成功构建了NTS-rEPA偶联蛋白,为今后针对NTS的研究奠定了基础.

关键词：恶性疟原虫、红细胞膜表面蛋白1、铜绿假单胞菌、外毒素、化学偶联

所属期刊栏目：30

分类号：R382.3+1;Q782(医学寄生虫学)

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：467-471