人骨形态发生蛋白-7在人骨肉瘤细胞U2-OS中的表达

摘要：

目的 探讨人骨肉瘤细胞U2-OS表达重组人骨形态发生蛋白-7(recombinant human bone morphogenetic protein-7,rhBMP-7)的可行性.方法 将hBMP-7成熟肽基因片段克隆至载体pcDNA3.1上,构建真核表达质粒pcDNA3.1-rhBMP-7.利用Lipofectamine 2000将重组质粒转染至U2-OS细胞中,采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测细胞中hBMP-7基因mRNA和rhBMP-7的表达.结果 真核组表达质粒pcDNA3.1-rhBMP-7经Nde Ⅰ和EcoRV双酶切及测序鉴定证明构建正确.pcDNA3.1-rhBMP-7质粒转染的U2-OS细胞中hBMP-7基因mRNA和rhBMP-7的表达水平均明显高于pcDNA3.1载体转染的细胞(P＜0.05).结论 成功构建了hBMP-7基因的重组表达质粒,并在U2-OS细胞中成功表达,为进一步研究hBMP-7的制备方法和建立新的表达系统奠定了基础.

关键词：人骨形态发生蛋白-7、U2-OS细胞、基因重组、基因表达

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分类号：R738.1(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金培养基金项目ZR2014CP024;济南大学自然科学基金青年项目XKY1418;山东省医学科学院医药卫生科技创新工程

在线出版日期：2017-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：381-385