携带低氧诱导因子-1α及角质细胞生长因子的减毒沙门菌TPHK的构建及其在低氧应激大鼠胃肠组织中的表达
目的 构建携带低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)的减毒沙门菌TPHK,并检测其在低氧应激大鼠胃肠组织中的表达.方法 从质粒pIRES-KGF中PCR扩增获得KGF基因片段,经双酶切回收后,与pIRES-HIF质粒进行连接,获得双基因重组质粒pIRES-HIF-KGF,CaCl2法转化减毒沙门菌Ty21a,获得重组菌株TPHK.将TPHK菌液灌胃给予大鼠,109 cfu/(只·d),饲养7d后,置模拟海拔6 000 m的高原低氧舱,舱内连续饲养7d,采集大鼠胃及小肠组织,ELISA法检测HIF-1α及KGF的表达水平.结果 重组质粒pIRES-HIF-KGF及重组菌株TPHK经双酶切及测序鉴定证明构建正确.给予TPHK菌液后可明显提高低氧应激大鼠胃及肠组织中HIF-1α及KGF的表达水平(P<0.001).结论 成功构建了携带HIF-1α及KGF的减毒沙门菌TPHK,且其可提高HIF-1α及KGF在低氧应激大鼠胃肠组织中的表达.
低氧诱导因子-1α、角质细胞生长因子、减毒沙门菌、大鼠
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R378.2+2;Q786(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
兰州军区兰州总医院重点课题2013-1015.
2017-03-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
137-140