人血清中猪抗人淋巴免疫球蛋白双抗体夹心ELISA检测法的建立及验证
目的 建立人血清中猪抗人淋巴免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,ALG)双抗体夹心ELISA检测法,并进行验证.方法 以免抗猪IgG包被酶标板,HRP酶标记的鼠抗猪IgG为二抗,建立人血清中ALG含量的双抗体夹心ELISA检测法,并对方法中包被浓度及二抗浓度进行优化,同时验证该方法的重复性、敏感性、准确性、特异性及稳定性.采用优化后的方法对14位严重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)患者进行ALG的血药浓度监测(therapeutic drug monitoring,TDM).结果 最佳包被浓度为1∶2 000,最佳二抗稀释度为1:8 000.参考品浓度在4.9 ～5 000 μg/ml范围内标准曲线的四参数Logistic曲线拟合较好,R2值为0.991 1,在4.9～ 156 μg/ml范围内的线性拟合也较好,R2值为0.991 5,批内重复性CV值均＜10％;其检测底限为0.39 μg/ml;浓度为500、50及5μg/ml参考品的回收率为91.2％～107.0％;该方法可特异性检测出注射ALG患者血清中ALG含量;包被好的ELISA板及二抗、底物于4及37℃条件下分别保存1～3周及1～3 d后检测结果均较稳定.经DAS 3.1.4软件分析,14名经ALG治疗的SAA患者血清中ALG的曲线下面积(AOC)为(7.3±5.1)mg/(L·d)(95％ CI),半衰期(t1/2)为(20.65±38.67)d(95％ CI).结论 该方法具有良好的重复性、准确度及稳定性,可用于ALG的TDM.
猪抗人淋巴免疫球蛋白、酶联免疫吸附试验
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R392-33
2017-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1328-1332
