差示扫描荧光法快速筛选高浓度人免疫球蛋白液体制剂处方

摘要：

目的 建立高浓度人免疫球蛋白液体制剂处方的差示扫描荧光(differential scanning fluorimetry,DSF)快速筛选法.方法 采用DSF法和差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)法分别测定高浓度人免疫球蛋白制剂的转变中点温度(Tmid)和变性温度(Tm),比较两种方法的一致性;同时检测人免疫球蛋白制品中聚集体形成量与Tmid值的关系;以Tmid为指标评价溶液环境对人免疫球蛋白制剂稳定性的影响;ELISA法检测人免疫球蛋白制剂中抗乙肝免疫球蛋白(抗-HBs)活性的影响.结果 不同制剂处方中DSF法测定的人免疫球蛋白的Tmid值与DSC法测定的Tm值呈线性关系,R2=0.963;Tmid值与制剂中聚集体形成量呈良好的线性关系,R2=0.933;制剂中蛋白浓度升高,其热稳定性降低,糖和糖醇及氨基酸类稳定剂的稳定效果优于氯化钠及精氨酸和谷氨酸的混合物;甘氨酸和脯氨酸对制剂中抗-HBs活性的保护效果与某些糖类和糖醇类相当.结论 DSF具有蛋白检测浓度范围广、样品用量少和检测速度快等优点,可用于高浓度人免疫球蛋白液体制剂处方的快速筛选.

关键词：差示扫描荧光法、差示扫描量热法、人免疫球蛋白

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分类号：R457.2;R392-33(治疗学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划2013CB733604;国家自然科学基金21406239

在线出版日期：2016-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：973-977,983