GⅡ.4诺如病毒抗原ELISA定量检测方法的建立及其应用
目的 建立G Ⅱ.4诺如病毒(Norovirus,NoV)抗原ELISA定量检测方法,用于重组G Ⅱ.4 NoV病毒样颗粒疫苗研制中抗原含量检测.方法 使用纯化的G Ⅱ.4 NoV病毒样颗粒作为免疫原,分别免疫新西兰大白兔和豚鼠,制备抗血清.以豚鼠抗G Ⅱ.4病毒样颗粒多抗作为包被抗体,HRP标记的兔抗G Ⅱ.4病毒样颗粒多抗作为检测抗体,建立G Ⅱ.4 NoV抗原ELISA定量检测方法,确定该方法的线性范围,并对该方法的准确度、精密度、稳定性、特异性进行验证;用建立的方法检测G Ⅱ.4病毒样颗粒制备过程中间品的抗原含量.结果 GⅡ.4病毒样颗粒内部参考品在15.6~ 250 ng/ml范围内,线性关系良好,R2>0.98,高、中、低3个浓度样品回收率在90.9% ~ 110.2%之间,板内和板间精密度试验的CV值均不超过15%;包被微孔板37℃放置6d,稳定性试验的CV值均小于15%;与G Ⅱ.4NoV病毒样颗粒之外的抗原均无交叉反应;可用于定量检测重组NoV抗原制备过程中不同阶段样品.结论 建立了G Ⅱ.4 NoV抗原ELISA定量检测方法,该方法准确度、精密度、稳定性、特异性、适用性均良好,为NoV病毒样颗粒疫苗的研制提供了质控方法.
GⅡ.4诺如病毒、酶联免疫吸附试验、定量检测
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R373.2;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2016-08-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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