内皮抑素过表达慢病毒载体的构建及其鉴定

摘要：

目的 构建内皮抑素(endostatin,ES)过表达慢病毒载体,并进行鉴定.方法 利用载体PUC57-ES构建GV365-ES慢病毒载体,转染293T细胞包装慢病毒,荧光显微镜下观察绿色荧光;Western blot法鉴定表达的目的蛋白;HIV-1ELISA法检测病毒滴度.结果 经PCR及测序鉴定证明慢病毒载体GV365-ES构建正确;转染细胞中荧光显微镜下可见绿色荧光,表达的目的蛋白相对分子质量约23 000;病毒滴度为2.1×108TU/ml.结论 已成功构建ES过表达慢病毒载体,为后期该病毒载体治疗实体瘤的观察及其作用机理的研究奠定了基础.

关键词：内皮抑素、慢病毒、载体

所属期刊栏目：29

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金81470133;湖南省科技计划项目2013SK3048.

在线出版日期：2016-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：805-809