抗细粒棘球绦虫EdiagA864单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 制备抗细粒棘球绦虫EdiagA864单克隆抗体,并进行鉴定.方法 以细粒棘球绦虫EdiagA864蛋白为抗原,经皮下多点免疫BALB/c小鼠,共免疫4次.末次免疫3d后制备小鼠脾细胞,在聚乙二醇(PEG)的作用下与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,间接ELISA法筛选出阳性杂交瘤细胞株进行克隆,检测其染色体数及分泌的单克隆抗体亚型.采用体内培养法大量制备抗细粒棘球绦虫EdiagA864单克隆抗体,并经正辛酸-饱和硫酸铵法和HiTrap Protein G HP亲和层析结合法纯化.结果 经筛选克隆共获得4株可产生细粒棘球绦虫EdiagA864单克隆抗体的杂交瘤细胞株:2D12、3H4、4A6和6E5,细胞染色体数分别为97、101、98和96,重链亚型均为IgG1,轻链亚型均为Kappa.2D12、3H4腹水效价为2×105,4A6和6E5腹水效价为1×105.纯化后的2D12抗体可见相对分子质量为46 000和26 000的重链和轻链条带.结论 本实验获得的2D12是一株稳定的杂交瘤细胞株,且可产生高效价细粒棘球绦虫EdiagA864单克隆抗体,为细粒棘球绦虫病的免疫诊断奠定了基础.

关键词：细粒棘球绦虫、EdiagA864蛋白、单克隆抗体、杂交瘤细胞

所属期刊栏目：29

分类号：R383.3+3(医学寄生虫学)

资助基金：国家公益性行业农业科研专项201303042.

在线出版日期：2016-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：606-609