鸡白痢沙门菌减毒疫苗候选株冻存条件的优化及冻存菌株的遗传稳定性
目的 优化鸡白痢沙门菌减毒疫苗候选株冻存条件,并检测冻存菌株的遗传稳定性.方法 采用平板活菌计数方法检测添加不同保护剂(5%蔗糖水溶液、5%蔗糖脱脂乳液、5%蔗糖脱脂奶粉液、1.5%明胶水溶液),并于不同温度(常温、4℃、-20℃)及不同保存时间(常温冻存0、15和30 d,4及-20℃冻存0、30、60、90、120、210和540 d)条件下冻存的减毒疫苗候选株S06004△spiC的活菌数,确定最佳冻存条件.检测经体内、外传代5、10、15、20代及原代减毒疫苗候选株S06004△spiC的生化特性,并对经体内、外传代20代及原代减毒疫苗候选株S06004△spiC进行PCR及测序鉴定.结果 最佳冻存条件为:添加5%蔗糖脱脂奶粉溶液,于-20℃下冻存,保存时间至少可达1.5年.经体内、外传代后,减毒疫苗候选株S06004△spiC的生化特性与原代一致,其目的基因序列均未发生变化.结论 成功优化了鸡白痢沙门菌减毒疫苗候选株的冻存条件,该候选株具有良好的稳定性,为后期研究其安全性及免疫学特性奠定了基础.
鸡白痢沙门菌、减毒疫苗候选株、冻存稳定剂、遗传稳定性
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S855.1+2;R392-33(动物医学(兽医学))
公益性行业农业项目201403054;“863”项目2011AA10A210-2;中国博士后基金2014M551670;江苏省博士后基金1302067C;扬州大学科技创新培育基金立项项目2015CXJ067.
2016-07-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
565-570