肠道病毒71型多克隆抗体F(ab')2片段的制备及其体外中和效果评价

摘要：

目的 制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)多克隆抗体F(ab’)2片段,并评价其体外中和效果.方法 采用硫酸铵分级沉淀法从EV71感染的兔血清中提取IgG,用胃蛋白酶进行酶解,正交试验确定最佳酶解条件;使用阴离子交换层析(Q Sepharose Fast Flow)纯化得到F(ab’)2片段,采用体外中和试验检测其对EV71的中和效果.结果 硫酸铵分级沉淀法得到电泳纯的IgG;最佳酶解条件为:胃蛋白酶与IgG按1:10的质量比混合,47℃反应4h,在此条件下,F(ab’)2的产率最大值为79.51％,且方差分析表明,酶切比例对F(ab’)2产率的影响最大,温度次之,时间对F(ab’)2产率的影响不明显;经阴离子交换层析纯化,可有效去除Fc片段,得到电泳纯的F(ab’)2;F(ab’)2具有与IgG、正常血清同等的中和效果.结论 成功制备了EV71兔多克隆抗体F(ab’)2片段,初步确定该F(ab’)2片段具有良好的体外中和效果.

关键词：肠道病毒71型、多克隆抗体、F(ab’)2片段、正交试验、中和效果

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分类号：R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：云南省应用基础研究计划面上项目2013FZ135、2013-FZ134.

在线出版日期：2016-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：384-388