人肠道病毒71型VP4多抗的制备及其应用

摘要：

目的 制备人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP4多抗,并鉴定EV71空心颗粒(empty particle,EP)和实心颗粒(full particle,FP).方法 构建重组表达质粒pGEX-6p-1-VP4,诱导表达并纯化GST-VP4融合蛋白,免疫家兔制备多抗.ELISA法检测抗体效价,免疫荧光试验(immunofluoreseenee assay,IFA)和Western blot法鉴定抗体特异性.应用制备的多抗经Western blot法区分EV71 EP与FP.结果 质粒pGEX-6p-1-VP4经双酶切及测序鉴定证明构建正确,纯化后的GST-VP4融合蛋白相对分子质量约32 000,以包涵体形式存在.免疫家兔后可获得效价达1010的多抗.兔抗EV71 VP4多抗可识别EV71原核表达及天然病毒颗粒中的VP0、VP4.结论 抗EV71 VP4多抗可应用于EV71 EP及FP的鉴定,为EV71的基础研究及疫苗研发提供了新的工具及方法.

关键词：肠道病毒71型、VP4、多克隆抗体

所属期刊栏目：29

分类号：R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2016-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：300-303,307