呼吸道合胞病毒抗体效价3种检测方法的建立及比较
目的 建立呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)抗体效价的3种检测方法,并进行比较.方法 棋盘滴定法优化ELISA法的包被抗原及酶标二抗的浓度,并检测该方法的线性范围及重复性;同时建立微量细胞中和试验法和蚀斑减少中和试验法,检测两种方法的重复性.用建立的3种方法及市售RSV抗体ELISA检测试剂盒同时检测55份健康人血清样本,并将两种ELISA法与两种中和抗体效价检测方法间的相关性进行两两比较.结果 ELISA法中包被抗原为10 μg/ml及HRP标记的山羊抗人IgG稀释度为1∶30 000时是最佳组合;在38.00～2.375 U/ml范围内,抗体浓度与A450/630值呈良好线性关系,R2=0.981 4;高、中、低3个浓度样本的变异系数(CV)均＜10％.微量细胞中和试验7d后,细胞病变明显,细胞成片脱落;连续6次检测抗RSV多克隆抗体中和效价的CV值为4.2％.RSV感染Vero细胞7d后出现明显的蚀斑形态,结晶紫染色后蚀斑边缘清晰;连续6次检测兔抗RSV抗血清效价的CV值为6.81％.本实验建立的ELISA法与市售ELISA试剂盒的相关系数(R)为0.787,微量细胞中和试验与蚀斑减少中和试验的R为0.937.结论 成功建立了3种RSV抗体效价检测方法,本实验建立的ELISA法与市售ELISA试剂盒间及两种中和抗体检测方法间具有良好的相关性.
呼吸道合胞病毒、抗体、效价、酶联免疫吸附测定、微量细胞中和试验、蚀斑减少中和试验
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R373.1;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
197-200,205
